​蛋白质制备与鉴定平台桌面式荧光相关光谱单分子分析仪上机培训通知

2023-10-13 13:19:09

蛋白质研究技术中心蛋白质制备与鉴定平台将于2023年10月18日、19日(周三、四)14:00-17:00在生物医学馆E203举行桌面式荧光相关光谱单分子分析仪smFRET功能讲座培训。

仪器介绍:Cortector SX300桌面式荧光相关光谱单分子分析仪整合了FCS、FCCS、smFRET等单分子分析技术,可在微量溶液样品中,无需反应物分离(均相),快速(数秒至数分钟)检测分子或纳米颗粒的摩尔浓度、扩散系数/水动力半径、相互作用亲和力、构象变化等特性,可广泛应用于细胞信号传导机制、生物分子结构-功能机制、生物分子变性聚集、生物分子液-液相分离、磷脂双分子层相分离、抗体与药物筛选、病原体检测、疾病标志物检测、酶活性检测、化学动力学常数检测、荧光探针分子或纳米颗粒特性分析、纳米药物在生理样品(血浆、全血)中的特性分析、外泌体分析、高分子聚合物分析、微流控技术开发等研究领域。

培训内容:smFRET技术原理与构象变化检测讲座,FCS测浓度、扩散系数/水动力半径上机培训,FCS/FCCS测分子相互作用上机培训,并交流实验技巧及问题讨论与解决。

培训时间:2023年10月18日、19日(周三、四)

培训日程:

      培训方式:线上线下相结合

联系方式:常老师changqing#mail.tsinghua.edu.cn(发送邮件时请将“#”替换成“@”)

报名方式:





访问链接:   http://proteinreasearch-e212.mikecrm.com/kINbzkj  


或扫描二维码:

备注:

1.上机培训请发送邮件报名(场地有限,限校内用户5人)。如自带样品需提前至少一天邮件联系。

2.报名截止时间10月17日17:00,报名截止后通过邮件发送培训链接,请提供准确的电子邮箱地址。


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蛋白质研究技术中心


附:自带实验样品上机要求

一、溶液或细胞裂解液样品需自发荧光或已被荧光标记

推荐使用Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 647、Atto488、Atto655、Cy5、Rhodamine Green系列染料,类型为溶液或细胞裂解液,FCS实验中样品浓度一般为1nM~100nM,若样品是质量浓度,建议提前换算成摩尔浓度,方便实验过程中进行稀释。

二、FCS测分子扩散系数、大小(水动力半径)实验样品要求

1、样品能被488nm/561nm/638nm激光激发。

2、样品直径<100nm。(BSA,66kDa,直径≈7nm,可作为参考)

、FCS测分子间相互作用实验样品要求

1、准备存在相互作用的两种分子,且两种分子的分子量相差四倍以上。

2、较小分子样品带有荧光标签或自发荧光,且能被488nm/561nm/638nm激光激发,且较大分子不会被488nm/561nm/638nm激光激发。(更推荐使用Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 647、Atto488、Atto655、Cy5、Rhodamine Green标记的样品)

3、样品直径<100nm。

、FCCS测分子间相互作用实验样品要求

1、准备存在相互作用的两种分子。其中一种分子能被488nm激光激发,不能被638nm激光激发;另一种分子能被638nm激光激发,不能被488nm激光激发。

2、样品直径<100nm。

五、smFRET测构象变化实验样品要求

待测分子标记两种不同的荧光分子,可从488/561/638激发中选择,要求两种荧光分子的量子产率>0.1,且光谱存在一定重叠,不同FRET荧光组合之间的Forster半径可从以下网站查到https://www.fpbase.org/fret/